Équipement disponible
Le plateau dispose d’un montage NIKON pour microscopie TIRF par objectif.
Ce système est installé sur un microscope inversé à fluorescence (Ti-Eclipse). Le microscope possède une chambre thermostatée (Life Imaging Series) permettant de conserver les échantillons dans des conditions physiologiques.
Ce système est équipé :
1. d’un bras pour l’éclairage en épifluorescence et d’un bras pour l’éclairage par onde évanescente. Ce microscope possède un système de PFS (Perfect Focus System) qui permet un maintien et une correction automatique de la mise au point en cas de dérives éventuelles.
Les sources lumineuses sont:
• Un système d’éclairage à fibre de mercure Intensilight de Nikon
• Deux lasers 50mW Cobolt SLM (Single-Longitudinal Mode) permettant d’exciter la fluorescence à 488 nm et 560 nm.
Pour l’excitation des fluorochromes, le Nikon TiE-Eclipse possède une tourelle motorisée de cubes de fluorescences.
Les cubes actuellement installés sont :
• Cube FITC:
Excitation : 488/10 nm ; Miroir dichroïque : 505 nm ; Emission : 525/50 nm
• Cube TRITC:
Excitation : 568/10 nm ; Miroir dichroïque : 565 nm ; Emission : 610/60 nm
• Miroir dichroïque multibande
2. des objectifs suivants:
• CFI Achromat LWD ADL 20X
• CFI Apochromat 60X TIRF O.N. 1.49 à huile permettant une réflexion totale du faisceau laser. L’objectif TIRF à huile corrige l’aberration sphérique induite par les changements de température dans l’indice de réfraction de l’huile d’immersion.
3. d’une caméra Photometrics EMCCD QuantEM 512SC (512×512 pixels; Roper Scientific)
La caméra est montée sur un système Photometrics Dual-View (Roper Scientific). Le Dual-View utilise une lame séparatrice unique pour diviser l’émission de lumière provenant d’un microscope en deux canaux indépendants. Chaque canal est alors projeté, en même temps, sur la moitié du capteur CCD de la caméra permettant ainsi l’acquisition simultanée de deux fluorescences.
4. d’un logiciel de pilotage et d’acquisition MetaMorph version 7.5 (Molecular Devices).
Vue d’ensemble de la configuration de la station de microscopie TIRF 
