Communiqué par l’Equipe Biologie et Pathologie du Pancréas Endocrine
La technique TIRF (Total Internal Reflection Fluorescence) utilise les propriétés uniques d’une onde évanescente pour exciter et éclairer sélectivement des fluorophores situés dans une zone restreinte de l’échantillon, adjacente à l’interface de contact cellule-lamelle de verre. Le principe d’obtention d’une onde évanescente est le suivant : lorsqu’un faisceau laser est dirigé vers la lamelle de verre selon un angle incident supérieur à un angle dit critique, le faisceau n’est alors pas réfracté mais réfléchi totalement et induit la formation d’une onde lumineuse, dite évanescente, dans la cellule adjacente à l’interface cellule-verre. Cette onde évanescente possédant une faible pouvoir de pénétration, plus on s’éloigne du point d’impact du laser plus son intensité décroit : elle ne va donc illuminer qu’une zone très mince de l’échantillon cellulaire, et uniquement exciter les fluorophores compris dans cette zone qui mesure entre 100 et 200 nanomètres de profondeur maximum. Pour une cellule déposée sur une lamelle de verre, il s’agira donc de la membrane plasmique. La microscopie TIRF apparaît donc comme un outil de choix pour l’étude des dernières étapes du phénomène de sécrétion régulée.
Disrupted dynamics of F-actin and insulin granule fusion in INS-1 832/13 beta-cells exposed to glucotoxicity: partial restoration by glucagon-like peptide 1. Quinault A, Gausseres B, Baibe D, Chebbah N, Portha B, Movassat J, Tourrel-Cuzin C. Biochim. Biophys. Acta. (2016), 182:1401-11.
